产品概述

Annexin V-FITC / 7-AAD细胞凋亡检测试剂盒是用FITC标记的重组人Annexin V来检测细胞凋亡时出现在细胞膜表面的磷脂酰丝氨酸（PS）的一种细胞凋亡检测试剂盒。可以使用流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备进行检测。Annexin是一类广泛分布于真核细胞细胞浆内钙离子依赖的磷脂结合蛋白，参与细胞内的信号转导。Annexin V选择性结合磷脂酰丝氨酸。磷脂酰丝氨酸主要分布在细胞膜内侧，即与细胞浆相邻的一侧。在细胞发生凋亡的早期，不同类型的细胞都会把磷脂酰丝氨酸外翻到细胞表面，即细胞膜外侧。磷脂酰丝氨酸暴露到细胞表面后会促进凝血和炎症反应。而Annexin V和外翻到细胞表面的磷脂酰丝氨酸结合后可以阻断磷脂酰丝氨酸的促凝血和促炎症反应活性。用带有绿色荧光的探针FITC标记Annexin V，即Annexin V-FITC，就可以用流式细胞仪或荧光显微镜直接检测到磷脂酰丝氨酸外翻这一细胞凋亡的重要特征。

7-AAD，英文全称为7-aminoactinomycin D，中文名称为7-氨基放线菌素D，是一种能够嵌入核酸的荧光指示剂，形成的DNA复合物在546 nm激发光下产生647 nm的最大发射光。7-AAD和碘化丙啶（PI）类似，是一种非细胞膜渗透性的荧光染料，不能穿过具有生物活性的细胞质膜，因此被用来区分正常细胞与坏死细胞，也可以用于细胞固定或通透后的核酸染色。与PI不同的是，7-AAD被546 nm的氩离子激光激发后，其发射光谱较PI窄，且发射波长更长，对其它检测通道的干扰更小，在多色荧光分析中是PI的最佳替代品。7-AAD在光谱的600 nm左右有较弱荧光，可用一般的荧光显微镜检测红色荧光，而在远红光650 nm左右有较强荧光，可用流式细胞仪FL3通道或配备650 nm长通滤光片的荧光显微镜检测远红外荧光。

因此将Annexin V-FITC与7-AAD进行共染，就可以区分不同凋亡时期的细胞。在双色流式细胞仪散点图上，Annexin Annexin V-FITC与7-AAD双阴性为正常细胞，Annexin V-FITC阳性、7-AAD阴性为早期凋亡细胞，7-AAD为晚期凋亡细胞或坏死细胞。

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