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腺相关病毒包装
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腺相关病毒包装

腺相关病毒载体(Adeno-associated virus, AAV)由直径约20-26nm的正二十面体蛋白质衣壳和约4.7kb的单链DNA基因组组成,AAV无包膜,不能独立自主复制,主要以游离于染色体的附加形式存在。研究中采用的重组腺相关病毒载体(recombination adeno-associated virus,rAAV)是在非致病的野生型AAV基础上改造而成的基因载体,由于其种类多样、免疫原性很低、应用性高、宿主细胞范围广(对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力)、扩散能力强、体内表达基因时间长等,rAAV被视为很有前途的基因研究和基因治疗载体之一。

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  • 产品概述

    腺相关病毒(adeno-associated virus, AAV)隶属微小病毒科(Parvoviridae),非包膜病毒没有包裹病毒颗粒的脂质双,二十面体颗粒,直径 20–26 nm,基因组为约 4.7 kb 的单链线性DNA,仅由蛋白衣壳和病毒内部的遗传物质组成。

    野生型 AAV(wt-AAV)可定点嵌入人 19 号染色体长臂,随宿主 DNA 复制而静默存续。重组 AAV(rAAV)则以目的基因替换病毒自身的 rep 与 cap 编码区,仅保留两端 ITR 结构,丧失整合酶介导的插入能力,进入细胞后主要形成环状游离体,降低插入突变风险。对于rAAV的生产,Rep和Cap区域通过不同的质粒以反式形式提供。

    rAAV 血清型差异决定组织嗜性、转导效率与免疫激活水平,是基因功能研究与体内示踪的常规载体。我们提供高质量的rAAV病毒包装服务,满足AAV感染的相关实验需求。

    AAV基因组结构

    AAV基因组为约4.7 kb 的线性单链DNA,两端各含一个145 nt 的反向末端重复(ITR),中间编码 rep 与 cap 两个开放读框。
    rAAV 保留双 ITR 作为包装与复制必需顺式元件,中间编码区被外源表达盒完全替换,成为仅含目的基因、启动子及调控序列的“空壳”载体。

    为了产生rAAV载体,需要三种质粒:

    转移质粒(也称为顺式质粒)——包含两个 ITR 之间目标转基因。

    包装质粒(也称为Rep/Cap质粒)——包含生产和组装病毒衣壳所需的Rep和Cap区域。

    辅助质粒——含有AAV基因组中不存在的腺病毒基因,这些基因是病毒复制所需的(E4、E2a和VA)。这些物质有时会在包装质粒中结合。

    腺相关病毒与腺病毒的比较

    腺病毒(AdV)属于腺病毒科,体型中等,含有双链DNA基因组。然而,腺相关病毒(AAV)是属于细小病毒科的小型单链DNA病毒。AAVs被发现是腺病毒制剂中的一种污染物,因此得名,但它们无关。AAVs需要腺病毒基因E1、E4、E2a和VA的存在才能复制。

    运输/储存

    AAV病毒存储在PBS缓冲液中,并采用干冰运输。收到AAV病毒后,立即放置于-80℃,可保存约一年。若放置于-20℃,则可保存2-3周,融解后的rAAV可在4℃保存1-2周。虽然rAAV比其他多数病毒稳定(如慢病毒),但是也请避免反复冻融,因为这会导致rAAV病毒滴度显著下降。


    For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.


    产品概述

    腺相关病毒(adeno-associated virus, AAV)隶属微小病毒科(Parvoviridae),非包膜病毒没有包裹病毒颗粒的脂质双,二十面体颗粒,直径 20–26 nm,基因组为约 4.7 kb 的单链线性DNA,仅由蛋白衣壳和病毒内部的遗传物质组成。

    野生型 AAV(wt-AAV)可定点嵌入人 19 号染色体长臂,随宿主 DNA 复制而静默存续。重组 AAV(rAAV)则以目的基因替换病毒自身的 rep 与 cap 编码区,仅保留两端 ITR 结构,丧失整合酶介导的插入能力,进入细胞后主要形成环状游离体,降低插入突变风险。对于rAAV的生产,Rep和Cap区域通过不同的质粒以反式形式提供。

    rAAV 血清型差异决定组织嗜性、转导效率与免疫激活水平,是基因功能研究与体内示踪的常规载体。我们提供高质量的rAAV病毒包装服务,满足AAV感染的相关实验需求。

    AAV基因组结构

    AAV基因组为约4.7 kb 的线性单链DNA,两端各含一个145 nt 的反向末端重复(ITR),中间编码 rep 与 cap 两个开放读框。
    rAAV 保留双 ITR 作为包装与复制必需顺式元件,中间编码区被外源表达盒完全替换,成为仅含目的基因、启动子及调控序列的“空壳”载体。

    为了产生rAAV载体,需要三种质粒:

    转移质粒(也称为顺式质粒)——包含两个 ITR 之间目标转基因。

    包装质粒(也称为Rep/Cap质粒)——包含生产和组装病毒衣壳所需的Rep和Cap区域。

    辅助质粒——含有AAV基因组中不存在的腺病毒基因,这些基因是病毒复制所需的(E4、E2a和VA)。这些物质有时会在包装质粒中结合。

    腺相关病毒与腺病毒的比较

    腺病毒(AdV)属于腺病毒科,体型中等,含有双链DNA基因组。然而,腺相关病毒(AAV)是属于细小病毒科的小型单链DNA病毒。AAVs被发现是腺病毒制剂中的一种污染物,因此得名,但它们无关。AAVs需要腺病毒基因E1、E4、E2a和VA的存在才能复制。

    运输/储存

    AAV病毒存储在PBS缓冲液中,并采用干冰运输。收到AAV病毒后,立即放置于-80℃,可保存约一年。若放置于-20℃,则可保存2-3周,融解后的rAAV可在4℃保存1-2周。虽然rAAV比其他多数病毒稳定(如慢病毒),但是也请避免反复冻融,因为这会导致rAAV病毒滴度显著下降。


    For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.


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